抗體剝離過程通常涉及將印跡膜浸泡在足夠劇烈的Western Blot抗體快速剝離液(1X) ED710中,以解離抗體或其他探針與轉(zhuǎn)印至膜上的目標(biāo)蛋白間的親和作用。情形是找到一種有效去除探針的通用剝離條件,同時不會去除或損壞印跡上的目標(biāo)蛋白。但由于每種抗體-抗原親和作用以及目標(biāo)蛋白都是特別的,所以沒有一種“一刀切”的剝離條件。實(shí)際操作中需要通過經(jīng)驗(yàn)測試和一些優(yōu)化工作來確定特定蛋白質(zhì)印跡系統(tǒng)的剝離條件。大多數(shù)情況下,在優(yōu)化條件后至少可實(shí)現(xiàn)一輪的剝離和再檢測,而在某些情況下則可實(shí)現(xiàn)多輪剝離和再檢測。
本方法用于處理錫或錫合金剝離所用的廢液的方法。希望從廢液中除去銅離子、錫離子并且有時希望除去鉛離子。三價鐵離子盡可能高的剝離能力在實(shí)踐中是酸可保留在廢液。目的是通過使被溶解的或懸浮的金屬化合物從剝離液中發(fā)生沉淀而恢復(fù)剝離液的剝離能力。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn),通過包括加熱剝離液并加入草酸鹽形成試劑的過程來改善沉淀效率可獲得冷人驚訝的良好結(jié)果。
溶液的剝離能力是指其從印刷電路板的表面上剝離錫的能力。在該剝離液中使用的硝酸對剝離能力具有影響。該剝離能力還受到其它無機(jī)酸和有機(jī)酸的影響。剝離能力由于用于氧化元素金屬和溶液中的金屬離子的酸的消耗而降低。
Western Blot抗體快速剝離液(1X) ED710是一種簡單溫和的剝離緩沖液,一般作為親和純化中的洗脫液。該緩沖液通??稍谑覝鼗?7°C下,于30分鐘內(nèi)解離大多數(shù)抗體-抗原相互作用,有時也可能需要孵育2小時。但在某些情況下,該緩沖液不能從印跡上有效剝離抗體??蓮挠≯E上剝離一抗和二抗,實(shí)現(xiàn)對同一印跡膜的多次重復(fù)檢測。兩種緩沖液均采用低pH值(2.8)的即用型無味配方,含有特殊添加劑,可解離硝酸纖維素(NC)或PVDF膜上的探針相互作用。通常,在37°C或室溫下使用Restore抗體剝離液孵育5-15分鐘,便可有效剝離抗體。在使用中性緩沖液(例如PBS或TBS)漂洗印跡膜后,便可檢測是否充分剝離了一抗和二抗,或直接用新的一抗和二抗重新檢測。