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Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X) ED510簡(jiǎn)介

發(fā)布時(shí)間:2022/9/10 點(diǎn)擊量:1204

WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)

CatalogNumber:ED510

 

 

01/產(chǎn)品概述:

立譜沃生物的WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)ED510,即WesternBlotRapidTransferBuffer(20X),是一種20倍濃縮的安全無(wú)毒害的用于WesternBlot實(shí)驗(yàn)的快速濕轉(zhuǎn)緩沖液。本產(chǎn)品采用全新的快速轉(zhuǎn)印配方,15-30min即可高效、快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。本產(chǎn)品為20倍濃縮(20X)溶液,使用前需要用適當(dāng)水和乙醇稀釋至1X。配制過(guò)程中,可用無(wú)水乙醇替代甲醇,無(wú)需使用劇毒的甲醇等試劑,安全無(wú)毒害。轉(zhuǎn)膜全程產(chǎn)熱小,無(wú)需外置冰浴。

 

 

02/產(chǎn)品組分

組分

ED510

Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X)

500 mL

 

 

03/保存條件:常溫運(yùn)輸。室溫干燥處保存,有效期12個(gè)月。

 

 

04/Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X) ED510產(chǎn)品特點(diǎn)

  1.轉(zhuǎn)印快速、高效——500mA恒流轉(zhuǎn)膜15-20分鐘或400mA恒流轉(zhuǎn)膜約20-30分鐘,即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至印跡膜上,轉(zhuǎn)膜效果好。

  2.無(wú)需外置冰浴,僅使用內(nèi)置冰盒即可——轉(zhuǎn)膜過(guò)程產(chǎn)熱非常小,無(wú)需外置冰浴,減少蛋白損失。相同的條件下使用傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液更容易導(dǎo)致過(guò)度發(fā)熱,而在發(fā)熱程度相似的情況下傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液需要轉(zhuǎn)膜更長(zhǎng)時(shí)間。

  3.使用安全——可用無(wú)水乙醇替代甲醇,選擇靈活,可避免使用有毒的甲醇等試劑。

 

 

05/適用范圍

  WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)適用于WesternBlot濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)膜。兼容各種常見凝膠,例如Laemmli膠、預(yù)制膠、FastPAGE、Bis-Tris膠等。

 

 

06/使用說(shuō)明

  一、WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(1X)1000mL的配制方法:

  取WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)50mL加入850mL超純水中,加入100mL無(wú)水甲醇(或無(wú)水乙醇),混勻,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

  二、Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X) ED510參考轉(zhuǎn)膜條件:

  根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件及儀器的不同,轉(zhuǎn)膜條件會(huì)有差別。通常條件下,轉(zhuǎn)膜電流可設(shè)置為電泳儀允許的最大電流。具體轉(zhuǎn)膜條件可根據(jù)電泳儀電流限定、凝膠厚度、分離膠濃度、目的蛋白分子量做出適當(dāng)調(diào)整。參考轉(zhuǎn)膜條件如下:

  1.梯度膠

  濃度4%~15%,厚度0.75mm,恒流400mA,30min以內(nèi)所有條帶均可完成轉(zhuǎn)膜。

  2.普通PAGE膠

  轉(zhuǎn)膜效率與分離膠濃度及厚度有關(guān),對(duì)于各濃度1.0mm凝膠,采用恒流400mA,按如下時(shí)長(zhǎng)即可將150kDa以下蛋白轉(zhuǎn)印*,若蛋白分子量大于150kDa,需延長(zhǎng)轉(zhuǎn)膜時(shí)間5-10min。

分離膠濃度

6%

7.5%

10%

12.5%

推薦轉(zhuǎn)膜時(shí)間

20 min

25 min

30 min

35 min

ØPAGE膠厚度越厚,轉(zhuǎn)膜效率越低。對(duì)于厚度1.5mm的凝膠,可將上表推薦的轉(zhuǎn)膜時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)5-10min。

 

 

07/WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)ED510注意事項(xiàng)

  1.PVDF膜使用前需用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕30秒以上進(jìn)行活化。

  2.轉(zhuǎn)膜液稀釋為1x后請(qǐng)盡快使用,應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間存放于室溫,短期內(nèi)保存建議放置于4℃冰箱。

  3.轉(zhuǎn)膜時(shí),如果出現(xiàn)報(bào)錯(cuò)而停止,需要根據(jù)情況查看是否是電壓或電流過(guò)載、轉(zhuǎn)膜液過(guò)多或過(guò)少、轉(zhuǎn)膜槽短路或斷路等異常情況。

  4.回收的轉(zhuǎn)膜液可重復(fù)使用1-2次,但為取得更好的轉(zhuǎn)膜效果,不建議多次重復(fù)使用,以免影響轉(zhuǎn)膜效率。

  5.為了您的健康安全,請(qǐng)規(guī)范操作,穿戴實(shí)驗(yàn)服與手套開展實(shí)驗(yàn)。

  6.本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及治療。

 

 

08/其他相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

Western Blot CBB Protein Safe Stain Solution (Decolorization Free, 1X)

ED410-1

100 mL

ED410-5

500 mL

Western Blot Rapid Blocking Buffer

(Protein Free, 1X)

ED610-1

100 mL

ED610-5

500 mL

Western Blot Stripping Buffer (1X)

ED710-1

100 mL

ED710-5

500 mL

Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer (1X)

ED810-1

100 mL

ED810-5

500 mL

Western Blot Ultra Sensitive

ECL Chemiluminescent Substrate Kit

ED910-1

100 mL

ED910-5

500 mL

 

 

 

 

 

 

 

 


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