簡要描述:人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞(永生化)(Human Endometrial Epithelial Cells )凍存條件:LeapWal 無血清細(xì)胞凍存液(貨號:PZ110R),替代方案:完*培養(yǎng)液或 FBS+ 10% DMSO
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人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞(永生化)
(Human Endometrial Epithelial Cells )
人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞(永生化)
細(xì)胞凍存
?。?)細(xì)胞生長狀態(tài)良好,細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行細(xì)胞凍存。首先,棄去培養(yǎng)上清,用PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
?。?)加1-2ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加與消化液等體積的含10%血清的完*培養(yǎng)基終止消化。
?。?)輕輕吹打細(xì)胞,待細(xì)胞完*脫落后吸出,1000rpm離心5分鐘。
?。?)棄去上清液,往細(xì)胞沉淀中加入1ml/支的立譜沃無血清凍存液(貨號:PZ110R),混勻后加入凍存管中。(例如:凍存2支細(xì)胞,加入2mL無血清凍存液)
?。?)將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可(如果追求更理想的細(xì)胞復(fù)蘇率,也可選擇使用程序降溫盒),如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放24小時以上。